近日，北京的新發(fā)地出現(xiàn)多個(gè)新冠肺炎本土確診病例，讓逐漸平靜的國(guó)內(nèi)疫情形勢(shì)再度緊張起來(lái)。

迄今為止尚未找到對(duì)抗 SARS-CoV-2 的特效辦法，藥物及疫苗的研發(fā)正在緊張的開(kāi)展中，全面解析 SARS-CoV-2，解開(kāi)蛋白密碼，是研發(fā)的重要前提。本文，我們大起底 SARS-CoV-2 編碼蛋白與 SARS-CoV 蛋白的同源性、分類及功能。

非結(jié)構(gòu)蛋白與結(jié)構(gòu)蛋白

SARS-CoV-2 是一種約 30kb 的陽(yáng)性單鏈 RNA 病毒，其基因組組成與 SARS-CoV 相似，兩者都是由兩個(gè)主要的開(kāi)放閱讀框（ORF）和幾個(gè)較小的下游 ORF 組成。

兩個(gè)主要的 ORF（ORF1a 和 ORF1b）編碼兩個(gè)多肽，被病毒編碼的蛋白酶切割后產(chǎn)生非結(jié)構(gòu)蛋白（nsps）。ORF1a 編碼 440-500 kDa 多肽（pp1a），該多肽經(jīng)過(guò)酶處理裂解成 11 個(gè)  nsps。ORF1b 編碼 740-810 kDa 的較大多肽（pp1ab），該多肽被切割為 16 個(gè) nsps。

在 SARS-CoV-2 中已鑒定出四種主要的結(jié)構(gòu)蛋白，包括刺突蛋白、核衣殼蛋白、膜蛋白和包膜蛋白，與 SARS-CoV 具有顯著的同源性。這四個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白由 ORF2-10 編碼，是病毒形成外殼和基因組衣殼化所必需的。與非結(jié)構(gòu)蛋白相比，結(jié)構(gòu)蛋白能引發(fā)更高水平的體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)。

結(jié)構(gòu)蛋白之刺突蛋白

SARS-CoV-2 的刺突蛋白是病毒表面的糖蛋白，由兩個(gè)主要功能結(jié)構(gòu)域 S1（14-667 aa）和 S2（668-1255 aa）組成，分別介導(dǎo)與宿主細(xì)胞受體結(jié)合和膜融合。病毒的附著和進(jìn)入宿主細(xì)胞取決于刺突蛋白的受體結(jié)合域（RBD：306-527aa）與特定細(xì)胞蛋白的相互作用。

研究表明，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 2（ACE-2）和蛋白酶 TMPRSS2 分別是 SARS-CoV-2 進(jìn)入宿主細(xì)胞所需的細(xì)胞受體和蛋白酶。靶向 ACE-2 的抗體（中和抗體 AF933，21 Citations），有望成為治療新冠肺炎的有效方法之一。

蛋白酶 TMPRSS2 和/或 cathepsin L 在 S1-S2 連接處切割刺突蛋白，從而使病毒包膜與細(xì)胞膜融合，促使病毒 RNA 進(jìn)入細(xì)胞。SARS-CoV-2 也可以被 furin 蛋白酶切割，其識(shí)別 S1-S2 連接處的四個(gè)氨基酸序列。除了在 S1-S2 連接處切割刺突蛋白外，細(xì)胞蛋白酶還可以剪切 S2 亞基，這對(duì)于刺突蛋白的激活和隨后的膜融合至關(guān)重要。

? SARS-CoV-2 與 SARS-CoV 的刺突蛋白序列比較如何？

SARS-CoV-2 的表面糖蛋白或刺突蛋白與 SARS-CoV 的刺突蛋白具有 76% 的序列同源性。Novus Biologicals? 提供了幾種用于檢測(cè) SARS-CoV 刺突蛋白的抗體，這些抗體可用于 WB、ICC / IF、ELISA 等多種應(yīng)用。根據(jù)Novus 的創(chuàng)新計(jì)劃，不妨試驗(yàn)其中的抗體用于檢測(cè) SARS-CoV-2。

用于檢測(cè) SARS-CoV 的刺突蛋白抗體：

結(jié)構(gòu)蛋白之核衣殼蛋白

核衣殼蛋白（419 aa）位于 SARS-CoV-2 病毒顆粒的核心，并與病毒 RNA 相互作用。在病毒組裝過(guò)程中，核衣殼蛋白在包裝病毒 RNA 基因組中發(fā)揮著核心作用。SARS-CoV 核衣殼蛋白還參與其他功能，例如調(diào)節(jié)宿主的細(xì)胞過(guò)程，包括細(xì)胞周期失調(diào)、抑制 IFN 產(chǎn)生和誘導(dǎo)促炎因子（例如 COX-2）產(chǎn)生等。

? SARS-CoV-2 與 SARS-CoV 之間的核衣殼蛋白序列比較如何？

SARS-CoV-2 與 SARS-CoV 的核衣殼蛋白具有 91% 的序列同源性。Novus Biologicals? 提供了幾種用于檢測(cè) SARS-CoV 核衣殼蛋白的抗體，這些抗體可用于 WB、ICC / IF、ELISA 等多種應(yīng)用。

用于檢測(cè) SARS-CoV 核衣殼蛋白的抗體：

最近美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院的一項(xiàng)研究成功建立了 SARS-CoV-2 感染的恒河猴動(dòng)物模型，并利用兔多克隆抗 SARS-CoV 核衣殼抗體（貨號(hào) NB100-56576）成功檢測(cè)了 SARS-CoV-2 病毒在感染組織中的存在。

感染 SARS-CoV-2 的恒河猴的病理變化。通過(guò)免疫組化檢測(cè)以下細(xì)胞/組織中的 SARS-CoV-2 核衣殼抗原：（g）Ⅰ 型肺泡細(xì)胞；（j）Ⅰ 型肺泡細(xì)胞，Ⅱ 型肺泡細(xì)胞及肺泡巨噬細(xì)胞；（k）縱隔淋巴結(jié)和（l）盲腸固有層中的巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。圖片由 bioRxiv March 21, 2020// doi. org/ 10. 1101/ 2020. 03. 21. 001628  一文 Figure 4 修改。

最新 SARS-CoV-2 重組刺突蛋白及核衣殼蛋白：

結(jié)構(gòu)蛋白之膜蛋白和包膜蛋白

膜蛋白（222 aa）和包膜蛋白（75 aa）是在病毒包裝中發(fā)揮作用的整合蛋白。眾所周知，SARS-CoV 的膜蛋白能使 SARS 患者產(chǎn)生中和抗體，而包膜蛋白介導(dǎo) SARS-CoV 的毒力，并扮演離子通道的角色。

? SARS-CoV-2 與 SARS-CoV 的膜蛋白和包膜蛋白序列比較如何？

SARS-CoV-2 與 SARS-CoV 的膜蛋白具有 91% 的序列同源性，包膜蛋白具有 95% 的序列同源性。Novus Biologicals? 提供了幾種用于檢測(cè) SARS-CoV 內(nèi)膜蛋白和包膜蛋白的抗體，這些抗體可用于 WB、ICC / IF、ELISA 等多種應(yīng)用。

用于檢測(cè) SARS-CoV 的內(nèi)膜蛋白和包膜蛋白抗體：

非結(jié)構(gòu)蛋白大揭秘

非結(jié)構(gòu)蛋白（nsps）在病毒復(fù)制周期中發(fā)揮不同的功能，編碼的 nsps（1-16）共同形成蛋白復(fù)制酶-轉(zhuǎn)錄酶復(fù)合物。

? SARS-CoV nsp5 和 nsp13 蛋白的抗體

SARS-CoV-2 與 SARS-CoV 的 nsp5 具有 96% 序列同源性，nsp13 具有 99% 的序列同一性。Novus Biologicals? 提供了針對(duì) nsp5（NBP1-78110）和 nsp13（nbp2-89168）蛋白的兔多克隆抗體，這些抗體可用于 WB、ICC / IF、ELISA 等多種應(yīng)用。

感染 6 小時(shí)后的 Vero-E6 細(xì)胞中，使用抗 SARS-CoV nsp13 兔多克隆抗體（NBP2-89168）進(jìn)行免疫熒光顯微鏡檢查。